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          不同穩助劑對生物肥保存中微生物數量的影響

          發布日期:2015-05-22 10:34:24
          助劑
          化肥對植物生長具有重要作用,但長期施用助劑會造成水體富營養化,土壤板結,產品品質下降[1]。微 生物肥料是由一種或數種有益活體微生物,特別是 植物根際促生菌(Plant Growth Promoting Rhi- zobacteria,PGPR )組合而成的,借助有益微生物代 謝過程或代謝產物,達到促進植株生長的目的[2?3]。
           
          微生物肥料生產成本低,能顯著提高農產品質量和 減少化肥使用量,在農業生產中發揮著越來越重要 的作用。保證微生物肥料中微生物的有效性是制備 微生物肥料的關鍵[4?6]。
           
          假單胞菌()是一種常用的PG- PR,可分解葡萄糖、產接觸酶、產氧化酶、還原硝酸 鹽,可通過聯合固氮、溶磷、產生鐵載體、產植物激素 等多種機制促進植物生長[7-8]。生物肥料在貯存過 程中,其有效活菌數會逐漸下降,嚴重影響產品質量 及施用效果,如何提高生物肥料在貯存過程中的活 菌數是提高其施用效果的重要一環。本研究選用的 假單胞菌似)YT3篩選于櫻桃根際土 壤,可產細胞分裂素和生長素,對于促進植物根系生 長、活化土壤養分具有積極作用,具備開發微生物肥 料的潛力[9?11]。以YT3為主要組成的復合菌劑 (YT3:乳酸菌:酵母菌=2 : 1 : 1)已證明具有良好 的促生效果[12]。本研究選擇多種助劑(碳酸鈣、黃 原膠、親水性白碳黑、氯化鈉和羧甲基纖維素鈉),研 究了其在復合菌劑貯存90 d后對活菌數的影響,以 期為生物肥料的貯存提供科學依據。
           
          1材料與方法 1.1試驗材料復合菌劑(YT3:乳酸菌:酵母菌=2 : 1 : 1); 碳酸鈣、黃原膠、親水性白碳黑、氯化鈉、羧甲基纖維 素鈉。
           
          1.2試驗方案設計1.2.1碳酸鈣加人量試驗固定加入黃原膠3. 5%,親水性白碳黑6沁,氯 化鈉羧甲基纖維素鈉4. 5%。改變碳酸鈣加人 量,分別為 1%。、2%。、3%。、4%〇、5%j和 6%〇。
           
          1.2.2黃原膠加人量試驗固定加人碳酸鈣3%,親水性白碳黑6%,氯化 鈉6%,羧甲基纖維素鈉4. 5%^改變黃原膠的加人 量,分別為 1%。、2%〇,3%,4%。、5%。和 6%〇。
           
          1.2.3親水性白碳黑加入量試驗固定加人碳酸鈣3%,黃原膠3. 5%,氯化鈉 6%,羧甲基纖維素鈉4. 5%。改變親水性白碳黑的 加人量,分別為 3%。、4%〇,5%〇,6%。、7%。和8%〇。 1.2.4氯化鈉加人量試驗固定加人碳酸鈣3%,黃原膠3. 5%,親水性白 碳黑6%,羧甲基纖維素鈉4. 5%。改變氯化鈉的加 人量,分別為 3%。、4%〇,5%,6%。、7%。和 8%〇。
           
          1.2.5羧甲基纖維素鈉加人量試驗固定加人碳酸鈣3%,黃原膠3. 5%,親水性白 碳黑6%,氯化鈉6%。改變羧甲基纖維素鈉的加人0505050505A5-4-4-3-3-2-2*LL°-C6%〇
           
          5%〇
           
          .F1 .
           
          be7%〇
           
          量,分別為 2%Q、3%,4%,5%。、6%。和7%〇。
           
          1.3試驗方法酵母菌、乳酸菌和假單胞菌YT3于豆芽培養基 上活化。酵母菌和YT3挑菌至200ml豆芽培養基, 37°C180rpm下搖菌48h。乳酸菌371下靜置培養 72h。用滅菌豆芽培養基調YT3:乳酸菌:酵母菌= 2 : 1 : 1。無菌條件下分裝滅菌的三角瓶,同時加入 相應的穩助劑,用滅菌豆芽培養基調節菌液中有效 活菌數為2.7\1080?11/1111,制成。保存90〇1后稀 釋涂布豆芽汁固體培養基,測定菌液中的有效活菌 數。
           
          1.4統計分析采用Excel 2007處理數據并制圖,采用SAS 8. 〇統計分析軟件進行方差分析,LSD法對不同處 理的有效活菌數進行多重比較。
           
          2結果與分析2.1碳酸鈣對活菌數的影響混合菌液中加人不同濃度的碳酸鈣對菌液中的 有效活菌數產生顯著影響(圖1)。不同碳酸鈣處理 中活菌數的變異系數為35. 97%,在外界條件一致 的條件下,當碳酸鈣濃度加入量為3%0時,有效活菌 數的含量最高,達3. OX 108 CFU/ml,分別比其他試 驗處理增加了 102. 70%、108. 33%、150. 01%、 66. 67%和74. 42%。當碳酸鈣加人量為4%。時,菌 液中的有效活菌數最低,差異顯著。
           
          圖1碳酸鈣濃度對苗液中活菌數的影響2.2黃原膠對活茴數的影響黃原膠濃度對混合菌液中活菌數影響如圖2所 示??梢钥闯?,不用黃原膠添加量對活菌數產生顯 著影響,不同黃原膠處理中活菌數的變異系數為 45. 39%,當黃原膠的濃度加人量為4%。時,有效活 菌數的含量最高達4. 4X108 CFU/ml,分別比其他 試驗處理高出 223. 53%、180. 25%、126. 80%、 7. U%和35. 80%,比初始菌液濃度高出62. 96%。 其次為黃原膠加入量5%。和6%。的試驗處理,同另外 3個處理之間差異顯著。
           
          1%〇296〇3%〇4%〇
           
          黃原股濃度圖2黃原膠濃度對苗液中活苗數的彩響2.3親水性白碳黑對活菌數的影響圖3可以看出,親水性白炭黑的不同加入量同 樣對菌液中的有效活菌數產生顯著影響。不同黃原 膠處理中活菌數的變異系數為82. 56%,這說明親 水性白炭黑的加入量對菌液中的有效活菌數影響非 常大。在外界條件一致的條件下,當親水性白碳黑 濃度加人量為5%。時,菌液中的有效活菌數的含量 最高達4.0X108 CFU/ml,同其他5個親水性白碳 黑加人量處理之間差異顯著,分別增加了 809.09%、 166. 67%、809. 09%、194. 12%和 127. 27%。加入 3沁和6沁親水性白碳黑處理的有效活菌數顯著最 低。
           
          4.54.03.女U3.02.52.0槭1.51.00.50.0C[~13%〇4%〇5%〇6%〇
           
          親水性白炎黑濃度圖3親水性白炭黑濃度對菌液中活菌數的影響 2.4氣化鈉對活菌數的彩響氯化鈉對菌液中的有效活菌數影響差異達顯著 水平(圖4)。不同氯化鈉處理中活菌數的變異系數 為55. 96%,在外界條件一致的條件下,當氯化鈉濃 度調整為為8沁時,菌液中的有效活菌數的含量最 高為2. 32X108 CFU/ml,分別比其他5個氯化鈉加 人量處理高出了 544. 44%、262. 50%、13. 73%、 56. 76%和71. 85%。雖然加人8%0時活菌數有一定 程度提高,但是同加人5%。時差異不顯著,因此,從 經濟角度考慮,氯化鈉加人5%。為宜。
           
          -0-5-0-5 2-L L0-(i&solx)^48^4%〇
           
          3%〇
           
          8%〇
           
          7%>0.05%〇6%〇
           
          氣化鈉濃度圖4氯化鈉濃度對菌液中活菌數的影響2.S羧甲基纖維素鈉對活茴數的影響混合菌液中加人不同濃度的羧甲基纖維素鈉對 菌液中的有效活菌數產生顯著影響。不同羧甲基纖 維素鈉處理中活菌數的變異系數為36. 22%,在外 界條件一致的條件下,當竣甲基纖維素鈉濃度加人 量為5%。時,有效活菌數的含量最高達3. 72X108 CFU/ml,分別比其他試驗處理增加64. 60%、 30. 99%、55. 09%、210. 12%和 102. 17%。羧甲基 纖維素鈉加入量為6%?)的試驗處理有效活菌數顯著 最低。
           
          0.02%〇3%〇4%〇5%〇6%〇796〇
           
          羥曱基纖維素鈉濃度圖S 羧甲基纖維素鈉濃度對苗液中活菌數的彩響3結論混合菌液中(假單胞菌:乳酸菌:酵母菌=2 : 1 :1)添加不同濃度的助劑(碳酸鈣、黃原膠、親水性 白碳黑、氯化鈉和羧甲基纖維素鈉)均可對有效活菌 數產生顯著影響。不同助劑對活菌數影響順序為親 水性白碳黑 > 氯化鈉 > 黃原膠 > 竣甲基纖維素 鈉 > 碳酸鈣。碳酸鈣和黃原膠的單因子試驗結果 認為,兩助劑的適宜添加比例分別為3%。和4%^而 親水性白碳黑、氯化鈉和羧甲基纖維素鈉的適宜添 加比例均為5%。將初始菌液有效活菌數濃度調整 為2. 7X108 CFU/ml,菌液在保存至第90 d時的有 效活菌數濃度均高于2.0 X108CFU/ml,符合微生物肥料行業質量標準[13]。
           
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